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    您知道ELISA試劑盒實驗時洗滌的重要注意事項嗎?

    發布時間: 2023-09-12  點擊次數: 247次

    洗滌是ELISA實驗中是最多次數的操作,也是非常重要的步驟。不嚴格的洗滌容易出現洗不干凈或交又污染現象,實驗重復效果差的現象。

    不管用多道加樣器、洗瓶、吸管,還是洗板機,嚴格按照說明書操作不要減少步驟洗滌的洗滌體積、洗滌時間和洗滌次數。注意標準化操作將減少實驗誤差和不同實驗之間的誤差。操作者常出現洗板不干凈現象,請比照“手工洗板小貼士"操

    1.洗液不要溢出孔外,以免污染相鄰的孔,特別是每次洗板的前兩遍,若高濃度的孔污染了低濃度的孔或空白孔,其造成的交叉污染的孔是洗不掉的,背景肯定會增高。

    2.特別注意:設計實驗的時候要考慮實驗孔的位置保證甩掉洗液時,空白孔、低濃度孔或陰性對照組在上面或一側或分開最好。同時注意甩掉洗液的動作翻轉(從正上方旋轉120-150度)要迅速、干脆。甩板不要手腕左右搖擺、旋轉來甩液體!甩出后以直線方式補2-3次甩出液體。

    3.用干凈的濾紙,不要用衛生紙,因為細小粉塵或者碎屑容易吸附到孔底,導致洗板不干凈,結果偏高或偏低,重復孔的數值也會相差很大。

    4.每次拍板不要重復在一個地方拍,特別是洗去酶的步驟;拍板不宜過輕,否則拍不干凈,拍板很用力不會對蛋白有什么影響。但注意不要太重,以至把板條給拍斷。每次洗板后輕叩幾下,最后一次一定要扣干凈。

    5.不能減少洗液體積、洗板時間和次數。洗板時間太短,洗板效果不佳。延長洗板時間和增加洗板次數可以使背景更干凈。

    洗滌是ELISA實驗中是最多次數的操作,也是非常重要的步驟。不嚴格的洗滌容易出現洗不干凈或交叉污染現象,實驗重復效果差的現象。

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